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上皮細胞是什么

2017-04-23 23:05:10  來源:360常識網   熱度:
導語:人體的細胞有很多,不同的細胞在作用上都是不同的,因此對細胞也是需要進行全面認識,這樣的人體細胞出現問題的時候,都知道它對人體健康有

人體的細胞有很多,不同的細胞在作用上都是不同的,因此對細胞也是需要進行全面認識,這樣的人體細胞出現問題的時候,都知道它對人體健康有著怎么樣的損害,人體各部位的喜歡是不一樣的,而且數量上也是不同,那上皮細胞是什么呢,在這個問題上也是很多人不太清楚的。

很多人低上皮細胞是什么并不了解,對這類問題都是可以進行詳細咨詢,使得對上皮細胞培養的時候,都是知道該選擇什么樣的方法最佳,同時不會損害自身健康。

上皮細胞是什么:

上皮細胞培養

1)表皮細胞培養

1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。

2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。

3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。

4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。

5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鐘。

6.用吸管輕輕反復吹打,使成細胞懸液。

7.培養液:通過80目不銹鋼紗網濾過后,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成細胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養。

2)乳腺組織培養

直接培養法:(適于培養含纖維少的軟組織)

1.在含有少量培養液或Hanks液的容器中,用鋒利刀片將組織反復切割成碎塊。

2.把組織碎塊連同液體注入離心管中,再補加少許培養液,用吸管吹打片刻,置試管架3~5分鐘。吸除上層液可排除非乳腺細胞部分。重復2~3次。

3.末次處理結束后,向沉降管中再補加培養液,用吸管稍吹打,使沉降物重懸。不待細胞團塊下降立即通過3~4層無菌紗布濾入另管中。

4.調整好適宜密度,接種入培養瓶中培養。

膠原酶消化法:(適于處理含纖維多的較硬組織)

其過程與培養其它組織相同。

3)胃上皮細胞培養

1.取材:取胃潰瘍或胃癌手術切除胃標本遠端非病變區粘膜少許。

2.清洗:用含慶大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用鈍器剝離下粘膜,剪成1mm3大小。

3.消化:在I型膠原酶和透明質酸酶中,于37℃中消化80分鐘。

4.離心:收集細胞懸液,800轉/分離心后,Hanks液漂洗兩次。

5.接種:末次離心后加入含有1%~2%胎牛血清的完全培養基,接種入不同孔數的培養板中,接種量依不同實驗目的而定。

4)肝細胞培養

初代組織塊培養:取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養法。

5)內皮細胞培養

1.取產后的新鮮臍帶。如不立即培養可以保存于4℃中,但不宜超過12小時。無菌剪取長10~15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管,亦可用于培養。

2.先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中,洗除殘血,注入口處宜用線繩結扎,以防液體返流。

3.用血管鉗夾緊臍帶一端,從另端向臍靜脈中徐徐注入最終濃度為0.1%的膠原酶,待末端出現液體后結扎之,令充滿血管,注入口亦應結扎,以防液體返流,消化3~10分鐘。

4.吸出含有內皮細胞的消化液,注入離心管中,為獲取更多細胞,可再注入溫PBS沖洗2~3次徹底清除干凈殘余細胞,一并注入離心管中離心。

5.吸除上清,加1640培養液,制成細胞懸液,接種入瓶皿中培養,順利時2~3天內細胞即可長成單層。

通過以上介紹,對上皮細胞是什么呢,也是有著一些介紹,上皮細胞培養的方法是什么呢,都是有著詳細說明,不過在對它培養的時候,不能強行進行,要根據自身需求進行選擇,這樣對人體各方面,才會有很好的幫助。

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